两个光子显微镜如何工作以及租赁如何使您的实验室受益
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多光子显微镜是一种荧光成像技术，被认为是用于生存，完整生物组织成像的最佳技术。
MPM也称为两光子激发显微镜，两光子激光扫描显微镜或非线性激发显微镜，被视为替代共聚焦显微镜。
荧光显微镜是一种采用荧光标记来照亮生物样品的特定部分而不是使用外部光源的技术。然后使用电磁辐射“激活”荧光标签，从而照亮厚实的标本，例如器官和蛋白质。这允许发生图像检测和放大倍率，最终揭示了结构和功能。
但是，尽管这是一种强大的技术，但荧光成像具有缺点。当成像相对较厚的样品成像时，背景荧光可能会对图像产生负面影响。假设您只想在厚标本的表面上观察一些东西。在这种情况下，材料厚度的背景荧光通常会淹没材料表面的荧光灯。
共聚焦显微镜因在整个样品中引起光漂白和光损伤而臭名昭著。它仅从焦平面收集荧光信号，这会导致样品吸收剩余的激发光，从而在实时样品中产生重大问题。
多光子显微镜通过使用两个光子作为激发光，而不仅仅是一个光子来解决此问题，并通过激发光消除荧光信号的污染。MPM中使用的光子还具有较长的波长，其能量较低并进一步渗透到样品中。这导致了高分辨率，体内，活细胞和生物组织的3D图像，并降低光漂白和光毒性。
MPM在生物学，生理学，胚胎学，神经生物学，神经科学和癌症研究到组织工程和皮肤病学的几个领域都有应用。
多光子显微镜变化，技术和价格
就像宽场或共聚焦显微镜一样，MPM基于荧光团激发。这种激发会导致光发射，然后可以观察和分析。
通常，荧光团用于染色样品，当它吸收特定波长的单个光子时会激发它。但是，在MPM的情况下，将两个或三个较长波长的光子集中在通过客观晶状体染色的样品区域，从而导致样品荧光的特定区域。
与使用一种光子的传统方法不同，光子必须在彼此之间的飞秒中击中分子。当它们同时触摸分子时，他们将样品的电子激发到更高，稳定的状态。正常状态和激发状态之间的这种能量差等于用来激发它的两个光子的能量之和。
由于需要精确，MPM中使用的聚焦激光器必须以非常高的脉搏速率发挥作用。这些脉冲激光通常称为飞秒激光器。在荧光团激发期间，两个光子的吸收以及紧密聚焦的激光急剧增加了荧光发射的可能性。
这有效地将激发荧光限制在样品中的一个小焦点，从而增加了对异常光的排斥。产生的荧光由高度敏感的检测器（例如光电倍增管管）收集。
这种局部激发和荧光是多光子成像是如此强大的工具的原因之一。此外，使用的光源通常是红外线或近红外，这会减少散射，进一步增加MPM生成高分辨率图像的功能。使用两光子显微镜的另一个好处是，它允许在更深入的深度下进行光学分段。由于使用的激光器的极端定位，它可以做到这一点，从而可以深入组织穿透。
三光子显微镜
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可以采用三光子激发显微镜来进一步减少荧光荧光光，并减少组织散射的量。三光子和两光子激发显微镜具有非常相似的程序。
主要区别在于，该分子必须在荧光之前吸收三个光子，而不仅仅是两个光子。这也意味着，在三光子显微镜中使用的光子的激发波长比两光子激发显微镜（约910纳米）中使用的光子（约1300纳米）更长（约1300纳米）。
目前正在调查四片激发。但是，尚未发现大量的实际生物学用途。
第二谐成像（垫片）
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当使用荧光团和荧光对象成像时，光毒性和光漂白成为需要考虑的问题。
第二谐波成像显微镜（SHIM）是一种非线性光学技术，可利用第二谐波生成效应。这意味着分子并没有激发，因此否定了如此光毒性或光漂白的问题。
Shim可以通过检查材料创造第二谐光的能力的变化来观察细胞和生存组织的结构。当相同频率的两个光子击中材料，结合并生成新的光子的两倍的初始光子能量时，就会发生第二谐光光。即使样品相对较厚，SHIM也可用于创建样品的3D图像。
此外，通常不需要荧光团标记，因为有机结构自然会产生第二谐的产生信号。这意味着可以在不变的状态下观察样品。
Maria Goeppet-Mayer：两光子吸收
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两光子激发显微镜基于两光子吸收的反应。这是由玛丽亚·戈珀特·玛耶（Maria Goeppert-Mayer）博士在哥廷根大学（Göttingen）的博士学位论文中于1931年首次预测的。
但是，在验证她的理论之前，它将需要三十年的时间和激光的发明。她的博士委员会有三名诺贝尔奖获奖者：她的顾问Max Born，James Franck和Adolf Otto Reinhold Windaus。
为了认识到产生两光子荧光光学显微镜，两光子吸收横截面的单元以她的Goeppert Mayer命名。她将在1940年代在莎拉·劳伦斯学院（Sarah Lawrence College）担任老师的美国科学生涯。在那里，她加入了曼哈顿项目，并与另一位诺贝尔奖获得者哈罗德·乌里（Harold Urey）合作。
战争结束后，她在芝加哥发现自己是核研究所物理学系的副教授。她因智力而受到认可，并最终在Argonne国家实验室中获得了另一个职位，她回答说：“我对核物理学一无所知。”
在芝加哥期间，她在核壳模型上写下了自己的理论。在其中，她数学上解释了为什么原子核中的特定构型导致稳定的结构。后来，她将获得诺贝尔物理学奖，成为玛丽·库里（Marie Curie）之后的第二位女性。
非线性和双光子激发显微镜租赁以满足所有需求
无论成像系统的确切类型如何，筹集显微镜采集通常都可能非常昂贵。实际上，直接购买多光子显微镜可能不在您的预算中。
但是，没有适当的组织成像设备可以阻碍您实验室进行基本研究的能力。当预算是一个问题时，找到解决方法对于成功至关重要。
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经营租赁
该学期结束时，这种平衡表融资结构提供了三个选择。承租人可以选择将设备返回出租人，以折扣价续签或购买公平市场价值的工具。每月付款也是100％税收抵扣，可节省额外的货币节省。
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两光子激发显微镜制造商和型号
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尼康：
A1R MP+，A1 MP+
奥林巴斯：
FVMPE-RS
布鲁克：
Ultima系列，Ultima 2pplus，Ultima在体外，Ultima研究者
萨特乐器：
可移动客观显微镜（MOM），3P-MOM，DF-SCOPE
tautec：
夹层
