荧光显微镜如何工作?我们如何节省您的时间和金钱

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显微镜几乎应用于所有的科学领域，被用来使肉眼更容易看到小物体。根据类型的不同，它们被用于从普通生物学到量子物理的各个领域。

显微镜是根据它们使用的放大方法来组织和分组的。例如，光学显微镜利用光和一系列镜子来产生样本的放大图像。光学显微镜的两大类是简单显微镜和复合显微镜。

简单显微镜和复合显微镜的区别在于，简单显微镜只使用一面镜子，而复合显微镜使用多个镜子。最常见的光学显微镜使用可见光作为光源。然而，显微镜也利用其他光谱。

荧光是指由于吸收光而发出的光。当带有GFP或其他荧光染料的材料暴露在电磁辐射下时，它会吸收这些辐射，并重新发射一部分。由于光子的固有吸收和发射时间，有机或无机物体吸收和发射辐射之间的时间差不到一毫秒。

一旦物体不再被辐射击中，它就会停止发出荧光。当辐射源消失后，材料发出光，称为磷光。荧光物体从荧光色素重新发射的光具有更低的能量和更低的波长特征，使其可用于不同的分析技术。

荧光的一个例子可以看到，当一个人使用黑光时，以前看不见的颜色突然被照亮。其他常见的自发荧光的例子包括矿物质和各种生物发光的动物和植物，如藻类，鱼类和昆虫。

荧光显微镜是利用荧光和磷光来识别和观察特定微观物体的一种光学显微镜。待观察材料的区域用荧光团标记染色，只照亮样品的预期部分。

样本被特定激发波长的电磁辐射撞击，随后被荧光团吸收，荧光团发出比入射光波长更长的荧光辐射。这种波长上的差异可以用来过滤来自光源的光，并且只通过光谱发射滤光片分析来自荧光样本的光。

使用适当的显微镜技术，荧光显微镜可以很容易地获得活细胞、抗体等的详细成像。组成这些成像系统的主要组件包括:

• 光源:常见的有氙气弧光灯和汞灯
• 激发滤光片:从光源滤除不需要的特定波长。
• 二色镜:滤除特定光谱的光或颜色。也叫干涉滤光片或精确彩色滤光片。
• 发射滤光片:滤除非荧光光谱以分析所需的荧光。

根据标记标本的特定荧光蛋白选择不同的滤光体和分束器。单个荧光团被一次成像，这意味着一个窄波长或一个“颜色”的样本被一次观察到。

将多幅单色图像拼接在一起，就可以得到高分辨率的多色图像。理解如何正确地进行荧光成像对荧光显微镜至关重要，因为运行样品太多次会导致光漂白，导致荧光分子停止响应。